目前醫院常規一般用鹽水法,但鹽水交配不能檢出性IgG抗體,因而有反應的危險。而檢測紅細胞血型IgG抗體所用酶法,抗球蛋白法由于步驟多、時間長及試劑、等因素不適合常規及急診配血。Polybrene法(聚凝胺)能快速、靈敏地檢測IgG抗體。現將上述四種檢測IgG抗體的方法比較如下。
1 材料與方法
1.1 試劑 Polybrene試劑盒由東耀企業有限公司提供。
1.2 標本 共144份,取上海市內醫院各種疑難血型標本,孕婦(有流產史及分娩新生兒溶血病患兒病史)、獻血員Rh(-)標本。
1.3 方法
1.3.1 試管內加2滴血清(或血漿),加不規則抗體篩選用的3~5% RBC懸液2滴,加LIM液0.6 ml,室溫靜置1 min,加Polybrene液2滴,混勻室溫靜置15 s,離心棄上清液,再加“復懸液”2滴。直接看結果。
1.3.2 若檢測陽性,則有IgG抗體存在,進一步檢測抗體特異性及抗體效價,以觀察Pulybrene法檢測出IgG抗體特異性及敏感性的能力。
2 結果
2.1 本組實驗標本144例,其中檢測出抗D、抗cE、抗C、抗E等IgG抗體陽性標本8例,對其特異性用酶法,抗球蛋白法及Polybrene法進行紅細胞譜抗原吸收放散試驗,證實了抗體特異性,3種方法檢測結果見表1。
表1 三種方法檢測紅細胞血型IgG抗體特異性比較
| 編號 | 酶法 | 抗球蛋白法 | Polybrene法 | 抗體特異性 |
| 1 | 3+ | 3+ | 3+ | 抗-cE |
| 2 | 4+ | 4+ | 4+ | 抗-D |
| 3 | 4+ | 4+ | 4+ | 抗-D |
| 4 | 3+ | 3+ | 3+ | 抗-c |
| 5 | 2+ | 2+ | 2+ | 抗-D |
| 6 | 3+ | 3+ | 3+ | 抗-E |
| 7 | 3+ | 3+ | 3+ | 抗-D |
| 8 | 2+ | 2+ | 2+ | 抗-E 2.2 應用 3種方法對檢出的8例特異性抗體進行效價測定,以證實用Polybrene法檢出IgG抗體特異性強,敏感性高,見表2。 表2 檢測紅細胞血型IgG抗體敏感性比較 編號 鹽水法 酶法 抗球蛋白法 Polybrene法 1 - 64 64 64 2 - 256 256 256 3 - 256 256 256 4 - 32 32 64 5 - 4 8 8 6 - 64 64 64 7 - 128 128 256 8 - 8 8 16
2.3 Polybrene法對8例抗體檢出者在反應溫度、時間及操作步驟方面比較,證實該法比其他方法快速、簡便并且正確無誤。3 討論 目前,美、日及我國臺灣地區IgG抗體篩選及交叉配血廣泛應用Polybrene法。由于黃種人K-Ag(一種Kell血型抗原)幾乎為零,出現抗K-Ab概率極小,可不予考慮抗K抗體的漏檢。Polybrene法能檢出IgG,IgM抗體所引起的配血不合,其方法簡便快速可作為血庫常規配血方法推廣應用。 |