實驗室檢查
（1）尿液半乳糖檢查尿糖陽性，葡萄糖氧化酶法尿糖陰性，紙層析可鑒別出其為半乳糖。
（2）新生兒篩查半乳糖血癥用Beutler法過篩缺陷酶，觀察有無熒光的產生，以此作為最后評定的依據，本病無熒光產生。酶活性的缺陷也可從肝、腸黏膜、成纖維細胞及白細胞中得到反映。
（3）血半乳糖濃度測定正常濃度為110～194μmol/L(應用半乳糖氧化酶或半乳糖脫氫酶法)，患者其血濃度升高。
（4）尿半乳糖和半乳糖醇濃度測定可用酶法測定。
（5）紅細胞1-磷酸半乳糖測定。
（6）半乳糖代謝相關酶測定此為確診本病的重要依據。
（7）非特異性的生化指標測定諸如蛋白尿、葡萄糖尿等。
輔助檢查
（1）B超依據臨床表現選做B超。
（2）通過胎兒鏡采取胎血進行酶活性測定測定羊水中半乳糖醇的含量及羊水細胞中酶的活性等。做酶基因的突變分析,可對胎兒進行產前診斷。
（3）半乳糖呼吸試驗可對13C-半乳糖轉化為13CO2進行定量測定，以了解機體對半乳糖的氧化能力。