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  • 發布時間:2019-04-07 14:49 原文鏈接: 凝集素顯示糖類細胞化學實驗

    凝集素(lectin)是一種無免疫原性糖蛋白,與糖的結合有一定專一性,如伴刀豆凝集素只與葡萄糖、甘露糖結合,麥胚凝集素只與 N-乙酰葡萄糖結合。并且,凝集素還可與標記物結合,如膠體金、辣根過氧化物酶等,因此可將作為檢測糖基的一種簡單而具有選擇性的探針。不過由于糖類的復雜性以及凝集素特異的相對性,凝集素顯示糖類細胞化學結果相對比較粗糙。細胞成熟過程中、腫瘤細胞或細胞發生損傷等情況下,凝集素分布情況都可發生改變。

    實驗材料

    組織樣品

    試劑、試劑盒

    凝集素-膠體金探針鋨酸

    實驗步驟


    1. 制備或購買凝集素-膠體金探針。


    2. 組織常規固定,游離細胞打散,組織切片切薄。


    3. 漂洗 3 次。


    4. 5~25 μg/ml 凝集素-膠體金 15~25℃ 孵育 30~60 min。


    5. 漂洗、鋨酸固定同常規

    注意事項

    1. 凝集素與糖的結合屬于親和細胞化學,因此可參照免疫細胞化學方法。


    2. 如果凝集素為生物素化的凝集素,可以用 ABC 或親和素金標記顯示。


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