1、染色前:
①切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。
②撈片時,最好一張玻片撈一個組織,組織最好位于玻片的中間,美觀的同時也利于脫蠟(有時二甲苯的液面低于組織片的時候,達不到脫蠟的目的)。
③石蠟切片脫蠟到水時,一定要注意組織切片脫蠟務必要徹底(脫蠟時間不能太少)以使脫蠟后的組織達到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時染色液未能充分與組織接觸,最終導致染色效果不佳,甚至染不上顏色。
④在染色過程中最好不要在玻片上貼標簽紙,以避免脫蠟時把標簽紙也浸沒,致使標簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳。
⑤在染色前,用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈,這樣在滴加染液時就不會使染液溢出。
2、染色時:
①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。
②在染色過程中,前一個染液浸染完成后,在進行下一個染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟。
③ 每次滴加染液前,務必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。
④在滴加染液時,務必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費試劑。