單核細胞增多性李斯特菌為短小的革蘭陽性無芽胞桿菌，陳舊培養物有時變為革蘭陰性菌。在腦脊液中常成對排列，易誤認為肺炎球菌。染色過度脫色易誤認為流感桿菌。20～25°C時具運動性，37°C運動消失。微需氧，營養條件要求不高，在普通培養基上能生長，血清平板上生長良好，菌落周圍有狹窄的溶血環。根據菌體與鞭毛抗原不同可分為若干型，90%的臨床感染由Ia、Ib及Ⅳb型引起。
