早在1937年，Brokman等在研究風濕熱時，用鹽水提取的心臟組織浸出液為抗原，建立補體結合試驗，在82%的風濕熱患者中檢出了抗心肌抗體。迄今60余年來，這方面的研究一直沒有間斷，除采用經典的間接免疫熒光試驗(以人和大鼠的心組織為抗原片)外，還用過火棉膠(collodion)粒子凝集試驗、抗球蛋白消耗試驗、鞣酸處理的或醛化紅細胞凝集試驗，以及近年來采用的ELISA法和免疫印跡技術等，但由于心肌組織的抗原成分十分復雜，相應的自身抗體也是多種多樣的。以往的研究大致使用了4種方法：
①用人心臟或骨骼肌組織浸出液免疫動物后取得的抗血清；
②用A組鏈球菌免疫家兔的抗血清；
③用風濕性心臟病患者、鏈球菌感染后患者、心臟手術后患者、心肌梗死后綜合征患者血清；
④對結締組織病(如多發性肌炎)患者和重癥肌無力患者血清進行研究。結果發現。
用心肌浸液或A組鏈球菌細胞壁免疫家兔所獲抗體，可致三種免疫熒光圖譜：
①肌質周圍的/肌纖維膜(peripheral sarcoplasmic/sarcolemmal)的染色；
②心肌或骨骼肌肌原纖維間(intermyofibrillar)染色；
③較少見的平滑肌著染熒光。結締組織病(類風濕性關節炎、全身性紅斑狼瘡)、肝病(原發性膽汁性肝硬化)患者的血清可產生心肌、骨骼肌的彌散性肌原纖維間免疫熒光，重癥肌無力患者血清可使骨骼肌橫紋(A帶)著染熒光。在原發性膽汁性肝硬化患者血清中的抗線體粒抗體，也可使心肌出現強的肌原纖維間熒光。上述研究表明，以往所測的抗心肌抗體缺乏組織特異性和疾病特異性。20世紀90年代初期，有人從大鼠心肌提取心肌細胞膜抗原，用免疫印跡技術證實，病毒性心肌炎和擴張性心肌病患者血清中的抗心肌抗體，可與心肌細胞膜抗原中的鈣通道多肽和β1-腎上腺素能受體反應。1989年Schulze等報告，擴張性心肌病患者血清中有抗心肌線粒體ADP/ATP載體(腺嘌呤核苷酸易位酶，ANT)的自身抗體。ANT是線粒體內膜的一種蛋白質，其功能是將ATP轉運到細胞質供能，同時將胞質中ADP轉送到線粒體再次磷酸化。抗ANT抗體可影響ANT功能，使心肌細胞能量供給與需求平衡失調。最近，國內有人用免疫印跡法研究發現，病毒性心肌炎患兒，有抗ANT抗體者約占1/4。