(1)于分劃尺測微器取下接目鏡，旋下目鏡上的目透鏡，將目鏡測微尺放人接目鏡的中隔板上，使有刻度一面朝下，再旋上目透鏡，并裝入鏡筒內。
(2)將物鏡測微尺置于顯微鏡的載物臺上，使有刻度的一面朝上，同觀察標本一樣，使具有刻度的小圓圈位于視野中央。
(3)先用低倍鏡觀察，對準焦距，待看清物鏡測微尺的刻度后，轉動目鏡，使目鏡測微尺的刻度與物鏡測微尺的刻度相平行，并使兩尺的左邊第一條線相重合，再向右尋找兩尺的另外一條重合線
(4)記錄二條重合線間的目鏡測微尺的格數和物鏡測微尺的格數。
例如，在10×物鏡下，目鏡測微尺的10格等長于臺式測微尺的10格，即目鏡測微尺每小格的長度為10 mm。一般情況下，當目鏡為10×時，若物鏡為4×，目鏡測微尺每小格的長度為24 mm；若物鏡為l0×，目鏡測微尺每小格的長度為10 mm；若物鏡為40×，目鏡測微尺每小格的長度為2.5 mm；若物鏡為100×，目鏡測微尺每小格的長度為1mm [2]。