傳染性單核細胞增多癥的診斷，以臨床癥狀、典型血象改變和陽性血清學為主要依據，流行病學史有重要的參考價值。
(一)血象
外周血白細胞總數在正常范圍內或稍增多，最高可達(30～50)×109／L，分類中淋巴細胞和單核細胞明顯增多，可占50％以上。異常淋巴細胞的百分比可達10％～30％以上。在10％以上或絕對值在1×109／L以上時具有重要的診斷意義。異常淋巴細胞依其形態可分為泡沫型、不規則型和幼稚型。異常淋巴細胞一般自病起數日內即可出現，但大多于病程第1周末明顯增多，1～2個月后逐漸減少。
(二)嗜異性凝集試驗
方法簡便，適用于臨床常規應用。在病程第1周陽性率約為40％，第2周及第3周各可達60%及80 %以上，恢復期內迅速下降，抗體持續時間平均2～5個月。約10％的病例呈陰性反應，主要為輕型病例。
(三)EB病毒抗體測定
人感染EB病毒后，病毒膜殼抗原(VCA)、早期抗原(EA)和EB核抗原(EBNA)可誘導產生相應抗體，根據抗體對相應抗原的應答類型，可以確診。